AMAMFSAc11001 食品 色素添加剂(合成有机物) 色谱法 分光光度法
AM-AM-FS-Ac-11001
食品中的色素添加剂(合成有机物)
1 适用范围
苋菜红*，丽春红3R*，丽春红SX*，赤藓红，I号橙*，浅黄绿SF*，坚牢绿FCF，基尼绿B*，亮蓝FCF，靛蓝，萘酚黄S*，日落黄FCF，柠檬黄，AB黄*，OB黄*，SS橙*和油红XO*。(* 在美国不再允许使用。)
2.试验过程
2.1.鉴定
(a)油溶性染料——以氯仿为溶剂，将待测染料配成适当浓度的溶液。在分光光度计上测定该溶液的吸收曲线，与在同样条件下在同一仪器上测得的那些已知染料的氯仿溶液的吸收曲线相比较。如果分光光度法测定的数据与已知染料的数据不相关，则待测染料可能是一混合物。在这种情况下，按11-2进行测定。
(b)水溶性染料——制备合适浓度染料的中性溶液，选用合适的浓度，液槽和仪器进行分光光度分析。把溶液分为三份，在第一份加入少量醋酸铁晶体。在第2份加入HCl使之浓度大约为0.1M。第三份加入NaOH使之浓度大约为0.1M。测定这三种溶液的分光光度曲线，并把它们与在同样条件同样仪器上测得的那些已知染料的曲线相比较。
如果未知染料的分光光度数据和已知染料的数据无任何联系，则未知染料可能是混合物。在这种情况下，把未知染料溶液进行色谱分析。对于油溶性染料，可以使用下述的柱色谱法。
2.2.柱的制备
色谱管长约为1.cm，直径2.54cm。将玻璃棉塞轻轻地塞入管子的缩口部分。将大约40g粉末状的纤维素，制成稀的浆液，倒入柱中。随着纤维素的沉降，把液体排掉并加入更多的需用浆液直到全部加完。当液面落到几乎达到吸附床的顶部时，加入20%NaCl淋洗液。在最后一些淋洗液进入吸附床之前，关闭柱底部的缩口。柱子可以立即使用，也可以贮存几个星期再用(上述柱子对于总量为0.5—2mg的染料是足够用的，柱子的尺寸可以随着染料量的大小而改变)。
2.3.色谱分离
在中性的染料水溶液中加入足够的NaCl使之浓度为20%。把溶液注入柱子时不要使吸附床受到干扰，然后打开管子底部的缩口(拔出玻璃棉塞)，当最后一点溶液将进入吸附床时，加入几毫升20% NaCl溶液。如果任何染料都以中等速度移下柱子，继续用20% NaCl溶液淋洗。如果所有染料都停留在或接近柱的顶部，则改用10%NaCl溶液，如果这个溶液不能使染料移下柱子，则改用5%NaCI溶液，继续一半一半地降低NaCl的浓度，直到某一浓度的NaCl溶液能使染料以中等速度移下柱子。
继续加适当浓度NaCl溶液，直到染料被洗脱，收集。如果染料在下移过程中分离成二个或更多的色带，分别收集每一色带。在有些情况下，可能需要改变为更稀的NaCl溶液来洗脱上部的色带。如果有两种以上染料色带出现，则按4.1.(b)用分光光度法检查每一色带。如果这一步骤不能说明存在一种以上染料，就可以假定该染料不是混合染料。
3.来源
AOAC 官方方法930.38第17版